微RNA-887-3p能抑制大鼠椎间盘纤维环细胞中MDM4表达和细胞增殖并促进细胞凋亡 18
概述:方法 取8周龄SPF级雄性SD大鼠的纤维环组织,离心制备并鉴定纤维环细胞。实验随机分为4 组:正常组 (Normal group) 是不做任何处理的原代纤维环细胞;对照组 (Control group) 用10 ng/mL白细胞介 素-1β (interleukin-1β,IL-1β) 处理纤维环细胞24 h,形成退变细胞模型;干扰组 (miR-887-3p inhibitor) 是在对 照组的基础上用 Lipo3000 转染 miR-887-3p 抑制子;过表达组 (miR-887-3p mimics) 是在对照组的基础上用 Lipo3000转染miR-887-3p模拟物。采用CCK-8法检测各组细胞活力;流式细胞术检测各组细胞凋亡率;实时荧光 定量PCR法检测miR-887-3p和鼠双微体4 (murine double minute 4,MDM4) mRNA的表达;蛋白质印迹法检测 MDM4、Bcl-2和Caspase-3的蛋白表达水平。
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